在醫(yī)院和生物實驗室所使用的干熱滅菌設(shè)備主要是電干熱干烤箱和遠(yuǎn)紅外線干烤箱。對干熱滅菌效果監(jiān)測比較簡單,主要有兩種手段。在使用中按以下要求進(jìn)行。
(一)工藝監(jiān)測
1. 保證足夠的溫度與時間 干熱滅菌在一定的溫度下保持足夠的時間,如160℃、120min\170℃60min\180℃、30min。
2. 滅菌物品必須清潔干燥 干熱穿透性不強(qiáng)、不干凈的物品容易造成滅菌不徹底。
3. 合適的包裝 干熱滅菌物品的包裝材料shou先能耐高溫,金屬傳導(dǎo)型烤箱內(nèi)不適宜放大件包裝,對流型烤箱對包裝大小不太嚴(yán)格,但亦不能高于烤箱高度的2/3。
4. 正確擺放 干熱滅菌箱內(nèi)物品擺放應(yīng)安排有序,不能雜亂無章,裝量不能過滿,應(yīng)留有一定的空隙。
(二)、干熱滅菌效果監(jiān)測辦法
1、化學(xué)監(jiān)測法
(1)、檢測方法:將既能指示溫度又能指示溫度持續(xù)時間的化學(xué)指示劑3個~5個分別放入待滅菌的物品中,并置于
滅菌器**難達(dá)到滅菌的部位。經(jīng)一個滅菌周期后,取出化學(xué)指示劑,據(jù)其顏色及性狀的改變判斷是否達(dá)到滅菌條件。
(2)、結(jié)果判定:檢測時,所放置的指示管顏色及性狀均變**規(guī)定的條件,則判為達(dá)到滅菌條件;若其中之一未達(dá)到規(guī)定的條件,則判為未達(dá)到滅菌條件。
(3)、注意事項:檢測所有的化學(xué)指示劑需經(jīng)衛(wèi)生部認(rèn)可,并在有效期內(nèi)使用。
2、生物指示劑檢測法
(1)、生物指示劑指示菌株:枯草桿菌黑色變種芽孢(ATCC9372),菌片含量為5.0×105 cfu/片~5×106cfu/片。其抗力應(yīng)符合以下條件:在溫度160℃±2℃時,其D值為1.3~1.9min,存活時間≥3.9min,殺滅時間≤19min。
(2)、檢測方法:將枯草桿菌芽孢菌片分別裝入滅菌試管內(nèi)(1片/管)。
滅菌器與每層門把手對角線內(nèi),外角處放置2個含菌片的試管,試管帽置于試管旁,關(guān)好柜門,經(jīng)一個滅菌周期后,待溫度降**80℃時,加蓋試管帽后取出試管。在無菌條件下,加入普通營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基(5ml/管),以36℃±1℃培養(yǎng)48h,觀察初步結(jié)果,無菌生長管繼續(xù)培養(yǎng)**第七日。
(3)、結(jié)果判定:若每個生物指示菌片接種的肉湯管均澄清,判為滅菌合格,若指出菌片之一接種的肉湯管混濁,判為不合格,對難以判定的肉湯管,取0.1ml接種于營養(yǎng)瓊脂平板,用滅菌L 棒涂勻,放36℃±1℃培養(yǎng)48h,觀察菌落形態(tài),并做涂片染色鏡檢,判斷是否有指示菌生長,若有指示菌生長,判為不合格;若無指示菌生長,判為滅菌合格。
(4)、注意事項:檢測所有的生物指示菌片需經(jīng)衛(wèi)生部認(rèn)可,并在有效期內(nèi)使用。
干熱滅菌效果的生物監(jiān)測亦為G際標(biāo)準(zhǔn)菌株制備的的生物指示劑,即通用枯草桿菌黑色變種芽孢ATCC9372,用該細(xì)菌芽孢懸液定量沾染在特定(0.5cm×2.0cm)濾紙上,制成的干燥菌片,每片裝入一個透氣性紙袋內(nèi),這種芽孢菌片對干熱的標(biāo)準(zhǔn)抗力:在160℃干熱條件下染菌量為5×105~5×106cfu/片,D值1.3~1.9min。
監(jiān)測時將菌片放于玻璃平皿內(nèi),分布與上中層中央和底層內(nèi)中外等5個點,每點兩片;也可直接布放于不同位置的滅菌包內(nèi)。待滅菌結(jié)束時溫度冷卻時取出,在無菌室內(nèi)于無菌條件下將菌片接種到營養(yǎng)湯管內(nèi),于37℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)72h觀察結(jié)果,當(dāng)肉湯出現(xiàn)渾濁表示有菌生長,判定為滅菌不合格;肉湯仍然清澈透明則表示無菌生長,判定為滅菌合格。
每次監(jiān)測設(shè)備必須設(shè)陽性對照并且應(yīng)生長正常。