1.0目標

用生物指示劑驗證高壓滅菌器的滅菌效率。

2.0范圍

該程序適用于安裝在質(zhì)量控制實驗室微生物區(qū)域內(nèi)的高壓滅菌器。

3.0責任

3.1工作：技術(shù)助理（微生物學家）/行政人員
3.2檢查：行政人員/經(jīng)理

4.0問責制

系主任

5.0程序

5.1頻率：一年兩次
5.2有機體：嗜熱芽孢桿菌芽孢。（認證強度10 6）
5.3對批次/批次中用于驗證目的的一條條狀嗜熱芽孢桿菌孢子進行初步計數(shù)。
5.4孢子的初始計數(shù)：
5.4.1將試紙條無菌轉(zhuǎn)移至100 ml無菌生理鹽水中，保持1/2小時并進行熱震，將試管在70°C-80°C的水浴中放置15分鐘。
5.4.2用手掌搖動或渦旋震蕩試管以使孢子懸浮液均勻化
5.4.3根據(jù)初始計數(shù)，在無菌生理鹽水中進一步稀釋
5.4.4以不同的稀釋度一式兩份取每個等分試樣，使菌落計數(shù)不超過300 cfu /板。
5.4.5將已融化并冷卻至45°C至50°C的SCD瓊脂培養(yǎng)基倒入分配的板中，使其渦旋并使其固化。
5.4.6將平板倒置放置在55±2°C下孵育48-72小時。
5.4.7計算每個板的菌落數(shù)，并使用稀釋倍數(shù)計算平均數(shù)/條。
5.4.8如果初始計數(shù)不超過標簽聲明的150％且不小于標簽聲明的75％，則將試紙條用于驗證目的。
5.4.9在Annexure-I中記錄結(jié)果
5.5高壓滅菌器驗證
5.5.1在高壓滅菌器腔室中裝入配件和玻璃器皿。
5.5.2服用要求沒有。條狀標簽，貼上標簽并按如下所述放入高壓滅菌鍋內(nèi)。
5.5.3將試條放在培養(yǎng)皿中，分別按照雙門和豎式高壓滅菌器附件III和IV中給出的位置圖將其放置在高壓滅菌器中。
5.5.4保持一條未暴露的帶正控制。
5.5.5按照SOP（對于立式高壓滅菌鍋）和SOP（對于雙門高壓滅菌鍋），在121°C和15磅壓力下運行高壓滅菌鍋循環(huán)20分鐘。
5.5.6循環(huán)結(jié)束后，取出所有試紙。
5.5.7在無菌SCD（大豆酪蛋白消化）培養(yǎng)基試管（10毫升）上標記位置，日期和設(shè)備ID號。將試紙條無菌轉(zhuǎn)移到相應的標記SCD培養(yǎng)基試管中。
5.5.8將一根未曝光的膠條轉(zhuǎn)移到SCD介質(zhì)管中，并將其標記為“陽性對照”。
5.5.9保持一根未接種的SCD培養(yǎng)基管進行陰性控制。
5.5.10將所有試管在55°C±2°C下孵育14天。
5.5.11每天觀察試管，直到有條帶的SCD中試管，直到14天為止渾濁/生長。
5.5.12正面控制應在72小時內(nèi)顯示出生長。

5.6解釋
5.6.1如果在任何SCD培養(yǎng)基試管中均未觀察到生長，則表明設(shè)備性能令人滿意。
5.6.2如果在任一SCD培養(yǎng)基試管中觀察到生長，請鑒定進行革蘭氏染色的嗜熱脂肪芽孢桿菌的生長，同時將其與陽性對照進行比較。萬一發(fā)生故障，請檢查是否違反驗證規(guī)定，并停止使用設(shè)備。同時，糾正原因并執(zhí)行重新驗證。符合規(guī)定后，設(shè)備可用于常規(guī)用途。并重復循環(huán)。
5.6.3維護確認記錄并粘貼符合以下條件的校準卡。
設(shè)備名稱：
身份證號碼：
驗證頻率：
驗證
日期：驗證的截止日期：
驗證者：
5.7將結(jié)果記錄在Annexure-II中附上滅菌周期記錄圖和報告。

6.0縮寫

SCD =
大豆酪蛋白消化N.鹽水=生理鹽水
小時=小時
cfu =菌落形成單位
B. =芽孢桿菌
ml =毫升
％=百分比
° C =攝氏度
USP =美G藥典
＆=和
SOP =標準操作程序